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      細胞體外培養應注意的方面

      更新時間:2019-05-30  |  點擊率:2082

      細胞培養是很重要的一門技術。其培養效果受到多方面影響,可匯總如下:

       

      1、溫度。細胞生長需要適宜的溫度。通常來說,人和哺乳動物的細胞培養溫度要在35-37℃,鳥類細胞培養在38.5℃較好,鼠類細胞在34℃適宜生長。細胞對低溫的耐受力比高溫強。

       

      2、分離方法

      常用的分離方法有組織塊分離法和酶消化分離法。也有使用抗體或磁珠包被的抗體分離細胞。

       

      3、培養液

      1)血清:細胞培養時血清的濃度要控制在5%~20%,過高或過低的血清濃度都不利于細胞的生長和增殖。當然,也可以使用特別配制的商品化的無血清培養基。

       

      2)激素和生長因子:不同的細胞需要不同的激素和因子。常見有:雌二醇、孕酮、表皮生長因子、成纖維細胞生長因子。許多激素和因子對細胞有促增殖、分化作用。

       

      3)抗生素:常用的抗菌素是青霉素和鏈霉素。此外,卡那霉素、新霉素、兩性霉素、氯霉素、潮霉素都可以防止細胞培養過程中細菌和真菌的感染。

       

      4)支持物:有些貼壁細胞需要特定的支持物。常見的支持物有滋養細胞或生長基質(如膠原等)。

       

      4、接種的細胞密度:細胞密度過高和過低均不利于細胞生長。

       

      培養液的pH值:不同種動物或是同一種動物的不同部位對pH的要求各不相同。一般情況下,動物細胞培養液的pH值一般在7.2-7.4。除文獻報道外,自己也可進行摸索。如培養瓶蓋已松口,與外界氣體存在交換,培養箱內的CO2濃度以及培養液中的緩沖鹽成分及濃度也可影響培養液的pH值。

       

      品名:Ausbian精制新生牛血清

      貨號:VS500N

      批號:1712A

      規格:500ml/瓶

      市場價:1600元

      歡樂價:800元

      *活動:買10瓶送3瓶,100瓶送40瓶

       

      上海締一生物提供的Ausbian精制新生牛血清(γ照射),是在新西蘭政府獸醫管理局監管下的出口注冊屠宰場采集的。血清經過0.22微米過濾和15kGy的gamma射線照射,減少了存在微生物的風險。同時檢測過細胞毒效應,確保沒有病毒。在病毒分離方面,均未檢出BVD(牛病毒性腹瀉病毒) 、PI-3(牛副流感病毒3型)、IBR(牛傳染性鼻氣管炎) ,質量有保證,且價格正在優惠期。

       

      參考文獻

      黃蘭蘭,等. 影響動物細胞體外培養因素. 黑龍江動物繁殖. 2005,13(4):16-19

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